凍干外泌體是由什么制成的?
凍干外泌體是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室制造的,經(jīng)過研究以顯示,外泌體主要從干細(xì)胞提取制成的,例如間充質(zhì)干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等,經(jīng)過純化和質(zhì)檢處理,不存在遺傳物質(zhì)。
外泌體是無風(fēng)險(xiǎn)或低風(fēng)險(xiǎn)的,外泌體中沒有細(xì)胞物質(zhì),因此不存在任何疾病轉(zhuǎn)移或細(xì)胞排斥的風(fēng)險(xiǎn)。
凍干外泌體時(shí)常用的保護(hù)劑糖類保護(hù)劑有海藻糖(4% - 50mM)、山梨糖醇(10%)、蔗糖、甘露醇等;氨基酸包括谷氨酸、精氨酸、甘氨酸等(0.01M - 0.5M);血清成分如1%胎牛血清(FBS)可有效避免冷凍休克;脂質(zhì)體方面,部分提出在復(fù)蘇液中添加脂質(zhì)體。
凍干外泌體的復(fù)合保護(hù)劑配方比單一保護(hù)劑更有效,如甘露醇+山梨醇(1% - 10% + 3% - 15%);海藻糖與外泌體膜脂雙分子層結(jié)合,防止低溫導(dǎo)致的脂質(zhì)重排和囊泡聚集;添加維生素B等成分可進(jìn)一步提升外泌體在常溫下的穩(wěn)定性;保護(hù)劑濃度需根據(jù)外泌體來源和特性進(jìn)行調(diào)整,如間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體凍干保護(hù)劑配方為1% - 6%甘露醇與3% - 15%山梨醇組合。
外泌體凍干開發(fā)包括:保護(hù)劑篩選常用海藻糖、蔗糖、甘露醇等非還原性糖類,通過氫鍵穩(wěn)定脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu),減少冰晶損傷;凍干工藝曲線優(yōu)化的分析指標(biāo),水分殘留量(<3%)、復(fù)溶時(shí)間(<1分鐘)、形態(tài)(納米流式檢測,需要由用戶完成)。提供外泌體凍干保護(hù)劑篩選,凍干工藝優(yōu)化,凍干放大生產(chǎn)等。